为了确定蛋白质的一级结构，DTT可以将cys上的二硫键打开，使之成为线状多肽链，这样也便于抗体识别并结特定的位点[2]。对于包埋于蛋白质结构内部的二硫键，DTT通常作用较弱，这类二硫键的还原需先将蛋白质变（高温加热或加入变剂，铁皮保温如盐酸胍、尿素或SDS）[3]。DTT在离子状态下才有作用，pH7-9.5时作用强，pH降至3以下可终止其作用。PCR反应体系中加入DTT可以使蛋白质从DNA上释放出来，便于DNA和引物的结，提高扩增率。

作用浓度：DTT浓度太低起不到保护作用，浓度太高又会破坏结构。建议在0.5mM~1.5mM之间。有的抗体说明书会给出目的蛋白的佳使用浓度。